1. 在操作过程中应避免 RNase 污染,防止 RNA 降解或实验中的交叉污染,建议在专门的 区域进行 RNA 操作,使用专门的仪器和耗材,操作人员带口罩和一次性手套并经常更 换手套。
2. 实验尽量使用一次性塑料器皿,若使用玻璃器皿,应使用 0.1%DEPC(焦碳酸二乙 酯)水溶液在 37℃处理 12 小时,并在 120℃下高压灭菌 30 分钟后使用,或者将玻璃 器皿在 180℃下干热灭菌 60 分钟后使用。实验中用到的无菌水应使用 0.1%的 DEPC 处 理后进行高压灭菌。
3. 本试剂盒中的所有试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。所涉及的酶类使用后应尽快放回-20℃,避免反复冻融。
4. 本试剂盒必须使用特异性引物,引物的选择可根据具体实验来选择,引物设计的好坏 直接影响到 RT-PCR 反应的结果,设计引物时需考虑 GC 含量,引物长度,引物位 置,PCR 产物的二级结构等因素,建议采用专业的引物设计软件来设计。