（注意：以下举例为常规PCR 反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的 片段大小不同进行相应的调整和优化）
1. PCR 体系：
推荐体系（50 ul）
试剂 | 用量 |
模板 DNA | < 1μg |
10×快速高保真 Buffer | 5 μl |
dNTP Mixture(2.5 mM each) | 4 μl |
Primer 1 (10 μM) | 2 μl |
Primer 2 (10 μM) | 2 μl |
快速高保真 DNA 聚合酶（野生型） | 0.5 ~ 1 μl |
ddH2O | Up to 50 μl |
2. PCR 程序
过程 |
| 温度 | 时间 |
预变性 | 94℃ | 5 min |
| 变性 | 94℃ | 30 sec |
25~35 cycles | 退火 | 55-65℃ | 30 sec |
| 延伸 | 72℃ | 1kb/15 sec |
终延伸 | 72℃ | 5 min |
（注意：a 一般实验中退火温度与扩增引物的熔解温度 Tm 相当，无法得到理想的扩增效率时， 适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。）
3. 结果检测：反应结束后取 5 μl 反应产物，加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳 检测。