1. 实验前在 Buffer W1 和 Buffer W2 中按标签说明加入无水乙醇; 2. 如缓冲液 Buffer GL、Buffer W1 结晶或产生沉淀,可在 56℃水浴溶解; 3. 所有离心步骤均为室温下操作。
1、细菌培养时间一般为 12 ~ 16 小时,如接种量大则应减少培养时间,过度培养会降低质 粒质量甚至导致质粒 DNA 突变; 2、每次使用时都要注意 Buffer S2 和 S3 是否形成沉淀,如有沉淀 37℃溶解后再用; 3、注意 Buffer S1,S2 和 S3 的用量比例,若细菌量增大,需按比例放大这些溶液的使用量; 4、质粒的产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关,一般 1.5 ml 过夜培养菌体可收获约 10 ug 高拷贝质粒。
1、细菌培养时间一般为 12 ~ 16 小时,如接种量大则应减少培养时间,过度培养会降低 质粒质量甚至导致质粒 DNA 突变; 2、 每次使用时都要注意 Buffer S2 和 S4 是否形成沉淀,如有沉淀 37℃溶解后再用; 3、 质粒的产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关。
1、Buffer BL 的加入能够改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性,消除高 温潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。 2、 使用前请先检查 Buffer BL、Buffer GN 是否出现浑浊,如有混浊现象,可在 37℃水浴 中加热几分钟,即可恢复澄清。 3、 溶液 Buffer GN 含有 pH 指示剂,黄色,指示 pH≤7.5。 切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对 DNA 造成损伤。 4、 回收率与初始 DNA 量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。
1. 如 Buffer GTL 和 Buffer GL 产生沉淀,可在 56℃水浴溶解; 2. 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 DNA 片段小,提取量下降;3. 所有离心步骤均为台式离心机,室温下操作; 4. 按要求在 Buffer W1 和 Buffer W2 中加入无水乙醇。
1、如 Buffer GTL 和 Buffer GL 产生沉淀,可在 56℃水浴溶解; 2、 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 DNA 片段小,提取量下降; 3、 所有离心步骤均为台式离心机,室温下操作。